二、酶標(biāo)檢測儀檢測飼料中的三聚氰胺試劑配制：

1、20mM PBS： 0.62g NaH2PO4·2H2O+5.73g Na2HPO4·12H2O+9g NaCl，蒸餾水定容至1000ml

2、清 洗 液： 0.62g NaH2PO4·2H2O+5.73g Na2HPO4·12H2O+9g NaCl，蒸餾水定容至1000ml.+0.5ml 土溫20

三、酶標(biāo)檢測儀檢測飼料中的三聚氰胺樣品的前處理：    飼料（稀釋倍數(shù)：20）

1、稱1g飼料樣品，加入4ml甲醇；

2、震蕩1min，加入0.1g氯化鈉；

3、4000轉(zhuǎn)離心5min；

4、取上清液0.2ml加入到0.8ml的20mMPBS中，混勻；

5、取150ul測定。

四、酶標(biāo)檢測儀檢測飼料中三聚氰胺的過程:

1. 將所有試劑和樣品放回室溫20-28℃，但時間不要超過24小時;

2. 從鋁箔袋中取出所需數(shù)量的微孔條，固定在微孔板架上，將未使用的微孔條與干燥劑一起放入密封袋中存放;

3.用吸管將150ul標(biāo)準(zhǔn)品和樣品吸入相應(yīng)的微孔。確保每一種溶液都是用干凈的吸管來繪制的，以避免交叉污染。加入

每孔加入50ul三聚氰胺酶標(biāo)記物;

4. 輕輕搖動盤子60秒，20-28攝氏度孵育30分鐘;

5. 將微孔中的溶液倒入水槽中，將清洗液填滿微孔，搖勻丟棄，重復(fù)三次，共四次清洗盤子;

6. 清洗一次后，將溶液倒進(jìn)孔中，然后翻轉(zhuǎn)微孔板，在吸水紙上輕拍干燥;

7. 每個微孔加入100ul底物溶液;

8. 20-28℃孵育30分鐘;

9. 每個微孔加入100ul停止液;

10. 用萊恩德酶標(biāo)檢測儀在450nm下讀板